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赛普克CYPCO结核分枝杆菌抗体(IgG)检测试剂盒(酶联免疫法)操作方法及注意事项
[常见问题]  发布时间:2011-3-2 9:57:42  浏览次数:5961
(一)操作方法

1、检验前,将试剂盒从冰箱取出放置室温后使用。

2、试剂配制:将浓缩样本稀释液作15稀释(浓缩样本稀释液100μl+蒸馏水400μl)作为样本稀释应用液;将浓缩洗液作120稀释。

3、稀释样本:将血清1:100稀释(血清5μl+样本稀释应用液495μl)。

4、加样:将所需数量的板条固定于板架,各孔分别加入100μl待测样本,每次实验设空白对照、阴性对照、临界对照、阳性对照各2孔,分别加入样本稀释应用液、阴性、临界、阳性对照品各50μl,混匀,封板,37℃温育10分钟后弃去孔内液体,将稀释后的洗液注满各孔,洗板5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶标记液50μl,混匀,封板,37℃温育10分钟后弃去孔内液体,将稀释后的洗液注满各孔,洗板5次,拍干。

6、显色:每孔加入显色剂AB液各50μl混匀,封板,置37℃避光显色10分钟,每孔加终止液50μl,混匀,用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值。

7、酶标仪结果判断:

         性:[样本OD]/[临界对照品OD]1.2

         性:[样本OD]/[临界对照品OD] 1.0

         区:1.0≤[样本OD]/[临界对照品OD]≤1.2

灰区样本应进行重复检测, 若仍在灰区范围内则报告阴性。

8、目测结果判断:

目测:在不滴加终止液情况下,在白色背景下,观察各孔显色情况,显色高于临界对照者为阳性,低于临界对照或者接近临界对照显色者为阴性。